प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी सिद्धांतों का अनुप्रयोग और उपयोग
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के सिद्धांत और संरचनात्मक विशेषताएँ: प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी नमूने में प्रतिदीप्ति को उत्तेजित करने के लिए उत्तेजना प्रकाश के रूप में एक रंग फिल्टर प्रणाली के माध्यम से एक निश्चित तरंग दैर्ध्य (जैसे पराबैंगनी प्रकाश 3650 इंच या बैंगनी-नीला प्रकाश 4200 इंच) के प्रकाश को उत्सर्जित करने के लिए उच्च चमकदार दक्षता वाले बिंदु प्रकाश स्रोत का उपयोग करते हैं। पदार्थ द्वारा विभिन्न रंगों के प्रतिदीप्ति उत्सर्जित करने के बाद, इसे फिर ऑब्जेक्टिव लेंस और ऐपिस के आवर्धन के माध्यम से देखा जाता है। इस तरह, एक मजबूत विपरीत पृष्ठभूमि के तहत, भले ही प्रतिदीप्ति बहुत कमजोर हो, इसे पहचानना आसान है और इसकी संवेदनशीलता उच्च है। इसका उपयोग मुख्य रूप से कोशिका संरचना और कार्य के साथ-साथ रासायनिक संरचना के अध्ययन के लिए किया जाता है। प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी की मूल संरचना एक साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप और कुछ सहायक उपकरण (जैसे प्रतिदीप्ति प्रकाश स्रोत, उत्तेजना फ़िल्टर, दो-रंग बीम स्प्लिटर, ब्लॉकिंग फ़िल्टर, आदि) से बनी होती है। फ्लोरोसेंट प्रकाश स्रोत - आम तौर पर एक अल्ट्रा-हाई-प्रेशर मर्करी लैंप (50 से 200W) का उपयोग करता है, जो विभिन्न तरंग दैर्ध्य के प्रकाश का उत्सर्जन कर सकता है, लेकिन प्रत्येक फ्लोरोसेंट पदार्थ में एक उत्तेजना तरंग दैर्ध्य होता है जो सबसे मजबूत प्रतिदीप्ति उत्पन्न करता है, इसलिए एक उत्तेजना फ़िल्टर (आमतौर पर पराबैंगनी, बैंगनी, नीला और हरा उत्तेजना फ़िल्टर होते हैं), जो केवल एक निश्चित तरंग दैर्ध्य के उत्तेजना प्रकाश को गुजरने और नमूने को रोशन करने की अनुमति देते हैं, जबकि अन्य सभी प्रकाश को अवशोषित करते हैं। प्रत्येक पदार्थ को उत्तेजना प्रकाश द्वारा विकिरणित करने के बाद, यह बहुत ही कम समय में विकिरण तरंग दैर्ध्य की तुलना में लंबी तरंग दैर्ध्य के साथ दृश्यमान प्रतिदीप्ति उत्सर्जित करता है। प्रतिदीप्ति विशिष्ट होती है और आमतौर पर उत्तेजना प्रकाश से कमजोर होती है। विशिष्ट प्रतिदीप्ति का निरीक्षण करने के लिए, ऑब्जेक्टिव लेंस के पीछे एक अवरोधक (या दबाने वाला) फ़िल्टर आवश्यक है। इसके दो कार्य हैं: एक है प्रतिदीप्ति को परेशान करने और आंखों को नुकसान पहुंचाने से बचने के लिए ऐपिस में प्रवेश करने से उत्तेजना प्रकाश को अवशोषित करना और अवरुद्ध करना; दूसरा है एक विशिष्ट प्रतिदीप्ति रंग दिखाने के लिए विशिष्ट प्रतिदीप्ति को चुनना और गुजरने देना। दोनों फ़िल्टर को एक साथ चुना और उपयोग किया जाना चाहिए।
