बहु-फोटॉन लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी के लाभ और नुकसान
फायदे इस प्रकार हैं:
1। लाल या अवरक्त प्रकाश से उत्साहित, प्रकाश प्रकीर्णन छोटा है (छोटे कणों का बिखरना तरंग दैर्ध्य की चौथी शक्ति के विपरीत आनुपातिक है)।
2। पिनहोल की कोई आवश्यकता नहीं, इमेजिंग क्रॉस-सेक्शन से अधिक बिखरे हुए फोटॉन एकत्र करने में सक्षम।
3। पिनहोल डिफोक्यूज्ड या फोकल क्षेत्रों से उत्सर्जित बिखरे हुए फोटॉनों को अलग नहीं कर सकते हैं, और मल्टीफ़ोटन में गहरी इमेजिंग में बेहतर सिग्नल-टू-शोर अनुपात होता है।
4। एकल फोटॉन उत्तेजना के लिए उपयोग किए जाने वाले पराबैंगनी या दृश्यमान प्रकाश को आसानी से अवशोषित कर लिया जाता है और नमूना द्वारा बीम को फोकल विमान तक पहुंचने से पहले देखा जाता है, जिससे गहरी परतों को उत्तेजित करना मुश्किल हो जाता है।
5। जैविक माइक्रोस्कोपी अवलोकन के संदर्भ में, पहला विचार जीव की सक्रिय स्थिति को नुकसान पहुंचाने के लिए नहीं है, और पानी, आयन एकाग्रता, ऑक्सीजन और पोषक तत्वों के संचलन को बनाए रखने के लिए है। प्रकाश अवलोकन के क्षेत्र में, थर्मल और फोटॉन ऊर्जा दोनों को विकिरण खुराक और प्रकाश ऊर्जा के भीतर रहना चाहिए जो कोशिकाओं को नुकसान नहीं पहुंचाता है।
6। मल्टीफोटन माइक्रोस्कोपी के भी कई फायदे हैं। तीन-आयामी संकल्प, गहराई के आक्रमण, बिखरने की दक्षता, पृष्ठभूमि प्रकाश, सिग्नल-टू-शोर अनुपात, नियंत्रण, आदि के संदर्भ में, लेजर माइक्रोस्कोप में अद्वितीय या बेहतर विशेषताएं हैं जो पिछले लेजर माइक्रोस्कोप के पास नहीं थे।
मल्टीफ़ोटन कन्फोकल लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी को विभिन्न शोध और अनुप्रयोग क्षेत्रों में बढ़ाया गया है, यह उनके प्राकृतिक स्थिति में नमूनों पर तीन-आयामी गैर-विनाशकारी अवलोकन कर सकता है और सिस्टम के रिज़ॉल्यूशन और सिग्नल-टू-नोज़ अनुपात में सुधार कर सकता है। माना जाता है कि मल्टीफ़ोटन कन्फोकल माइक्रोस्कोपी से संबंधित यांत्रिक, सामग्री और लेजर प्रौद्योगिकियों के आगे के विकास के साथ, मल्टीपोटन कन्फोकल लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी में अधिक विकास और व्यापक अनुप्रयोग होंगे
नुकसान इस प्रकार हैं:
1। केवल प्रतिदीप्ति इमेजिंग के लिए।
2। यदि नमूने में क्रोमोफोर शामिल हैं जो उत्तेजना प्रकाश को अवशोषित कर सकते हैं, जैसे कि पिगमेंट, नमूना थर्मल क्षति के अधीन हो सकता है।
3। संकल्प थोड़ा कम हो गया है, हालांकि इसे एक साथ confocal छोटे छेदों का उपयोग करके सुधार किया जा सकता है, सिग्नल लॉस होगा।
4। महंगे अल्ट्राफास्ट लेज़रों की सीमाओं के कारण, मल्टीहोटन स्कैनिंग माइक्रोस्कोप की लागत अपेक्षाकृत अधिक है।
